培養(yǎng)基制備的注意事項有什么？

培養(yǎng)基的作用是為微生物提供生長和繁殖所需的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境條件。培養(yǎng)基的質(zhì)量直接關系到檢驗結果的準確性和可靠性，因此對于微生物檢驗而言，培養(yǎng)基的質(zhì)量控制尤為重要。那么培養(yǎng)基制備的注意事項有什么呢？讓我們一起來看看吧！

一、配制要求

正確按要求制備培養(yǎng)基是做好微生物檢驗的基礎。實驗人員使用商品化脫水合成培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基時，要嚴格按照產(chǎn)品說明進行配制，并做好配制記錄。在配制過程中，實驗人員需要嚴格遵守相關操作標準，佩戴口罩進行操作，避免吸入含有有毒物質(zhì)的培養(yǎng)基粉末，稱量、溶解應使用專門的角匙，不使用金屬制品，避免金屬離子混入培養(yǎng)基，影響微生物生長；準確稱量后，應先加入適量的水充分溶解，再加水至所需量進行加熱，加熱中應不斷攪拌，防止培養(yǎng)基在容器底部積聚；調(diào)節(jié)pH值，分裝到比培養(yǎng)基體積最少大 20%的容器中，按說明要求進行滅菌。粉末狀態(tài)的培養(yǎng)基開封后應存放在陰涼干燥處，及時使用，環(huán)境濕度過大會使培養(yǎng)基出現(xiàn)受潮、結塊、污染等情況。對于瓊脂類培養(yǎng)基，可采用沸水浴或流動蒸汽的加熱方式進行融化，但反復凍融只允許進行1次。

二、配制用水

水是配制培養(yǎng)基bu可或缺的一部分，一般使用純化水。還應定期檢查培養(yǎng)基配制用水的微生物污染情況，應符合純化水要求。

三、滅菌

滅菌能確保培養(yǎng)基質(zhì)量達標，實驗室常采用濕熱滅菌法，培養(yǎng)基應按照產(chǎn)品使用說明要求進行滅菌，每次滅菌需放置壓力蒸汽滅菌化學指示卡，驗證滅菌效果。一些培養(yǎng)基可以通過煮沸的方式進行滅菌，如結晶紫中性紅膽鹽瓊脂培養(yǎng)基、亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基。實驗人員應及時將培養(yǎng)基從滅菌鍋中取出，盡快冷卻至所需溫度，防止加熱過度，對實驗數(shù)據(jù)造成影響；要檢查培養(yǎng)基的pH值、色澤、均勻度等指標，確保符合要求后貼上標簽，標明名稱、日期、效期等基本信息。

四、制備

制備平板時，將滅菌后的培養(yǎng)基傾注于滅菌過的干燥平皿中，在平皿中形成至少3mm的厚度，直徑90mm的平皿通常需要加入18～20mL 的瓊脂培養(yǎng)基，需要保存或培養(yǎng)超過48h的培養(yǎng)基應傾注更多培養(yǎng)基 。培養(yǎng)基冷卻凝固后應立即使用或儲存，儲存時應標記好培養(yǎng)基名稱及制備日期，密封后放置在2～8℃冰箱中。制備斜面培養(yǎng)基時，應先將培養(yǎng)基分裝到試管中，通常每管加入10mL培養(yǎng)基，高壓滅菌，在培養(yǎng)基冷卻凝固前將試管傾斜一定角度放置，待冷卻凝固后方能使用和保存。對于液體培養(yǎng)基，根據(jù)使用要求直接分裝至三角瓶或試管中，滅菌，冷卻至室溫直接使用或保存。

五、培養(yǎng)基的儲存

驗收入庫的培養(yǎng)基應嚴格按照生產(chǎn)廠家標明的儲存條件、保存期限、使用方法保存和使用。開封后的商品化脫水合成培養(yǎng)基要放置在密閉容器中保存，在瓶身注明shou次開封日期 。實驗室自制培養(yǎng)基應避光、干燥保存，需冷藏的培養(yǎng)基可放置在2～8℃冰箱中保存，平板保存時間通常為2～4 周，瓶裝及試管裝培養(yǎng)基保存時間一般為3～6個月，具體效期應進行驗證。每次使用培養(yǎng)基前，要觀察顏色變化、流動性、均勻性、是否結塊和是否污染等情況。如果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基出現(xiàn)受潮、結塊、其他性狀明顯改變的情況，應停止使用。